СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА СТАРТОВЫХ ТРАДИЦИОННЫХ И ФЕРМЕНТИРОВАННЫХ КОМБИКОРМОВ ДЛЯ МОЛОДИ ТИХООКЕАНСКИХ ЛОСОСЕЙ

По итогам 2015 г. объем российского рынка комбикормов для аквакультуры оценочно составил 191,9 тыс. т

По данным лососевых рыбоводных заводов (ЛРЗ) Дальневосточного региона на 2016 г. потребность в сухих стартовых кормах для лососевых составляет более 200 т, причем в регионе используются главным образом (более 80 %) датские корма фирмы «Aller Aqua». Учитывая растущее развитие аквакультуры, через несколько лет потребность в качественных комбикормах для рыб может увеличиться в несколько раз.

 

Полномасштабное развитие интенсивного индустриального рыбоводства невозможно без разработки полноценных конкурентоспособных отечественных комбикормов, сбалансированность и качество которых определяются качеством ингредиентов (Пономарев и др., 2010).

 

Зарубежный и отечественный опыт разведения тихоокеанских лососей показал, что жизнестойкость (качество) выпускаемой в естественную среду молоди полностью зависит от состава применяемых искусственных комбикормов (Ogino, Kamizono, 1975; Halver, 1976, 1982; Ketola, 1982; Ogata, Konno, 1986; Валова, 1999, 2000).

 

Традиционно основным компонентом комбикормов, отвечающим за белковую составляющую, является рыбная мука, производство которой в России с середины 90-х гг. прошлого столетия постепенно сокращалось. Зачастую рыбная мука, выпускаемая нашими предприятиями, имеет пониженное содержание белка, повышенное содержание минеральных веществ, а также не соответствует требованиям стандартов для комбикормов по качественным показателям жира — содержанию свободных жирных кислот и перекисей.

 

В 1980-е гг. был разработан ряд отечественных сухих гранулированных комбикормов: ЛС-НТ, РГМ-8М, РГМ-9М (ВНИИПРХ), МКС-1-86 «СТАРТ», СГК-88 (ТИНРО-центр), прошедших производственную проверку на ЭПРЗ «Рязановский» в Приморском крае. Наиболее эффективным оказался корм МКС-1-86 «СТАРТ», который обеспечивал высокий темп роста, низкие кормовые затраты и не вызывал заметных патоморфоло-гических изменений в пищеварительной системе рыб (Валова, 1999). Однако в связи с прекращением производства некоторых компонентов корма в настоящее время корм МКС-1-86 не производится, тем не менее его рецепт послужил прототипом для разработки экспериментальных кормов.

 

Согласно современным представлениям в области физиологии и биохимии питания рыб, на усвояемость кормов оказывают влияние аминокислотный состав белковой компоненты, жирнокислотный состав липидов, а также содержание минеральных веществ. Это обусловливает эффективность усвоения пищи и, в свою очередь, сказывается на скорости роста и выживаемости личинок рыб (Мухин, Новиков, 2001).

 

Известно, что ферментированные продукты с разной степенью гидролиза белка, полученные из рыбы или моллюсков, при добавлении в рацион рыб как в чистом виде, так и с различными компонентами благотворно влияют на их развитие (Сергиенко, 2007; Грозеску, 2016). Количество добавляемых ферментированных продуктов в рыбные корма составляет от 5 до 20 %, увеличение концентрации приводит к значительному снижению кормового коэффициента (КК) и улучшению физиологического состояния рыбы (Грозеску, 2016).

 

Целесообразность включения в состав стартовых комбикормов легкоусвояемых белковых веществ обоснована особенностями развития пищеварительной системы рыб от личинок к молоди. При балансировке кормов для рыб качественный состав белка имеет первостепенное значение (Гамыгин, 1987).

 

Цель работы — сравнительная оценка применения комбикормов с добавлением сухого ферментолизата со стартовыми комбикормами для молоди тихоокеанских лососей (кеты).

 

Материалы и методы

 

Испытания комбикормов проводились на частном ЛРЗ «Вербное» (ООО «Фур-маново»), Ольгинский район Приморского края.

 

Объектом исследования служили личинки молоди кеты Oncorhynchus keta.

 

Подращивание молоди осуществляли в 6 аквариумах объемом 200 л, плотность посадки составляла 5000 экз./м2, проточность воды — 20-25 л/мин, температура воды — 4,5-6,5 оС, кислород — 60-70 г/л, продолжительность эксперимента — 40 сут.

 

Для испытания были выбраны два варианта комбикормов с введением 6 и 10 % сухого ферментолизата из минтая неразделанного мороженого (размерный ряд 18-25 см), технология получения которого основана на материалах патентов РФ N° 2460313 и 2503249.

 

В эксперименте по кормлению молоди кеты на ЛРЗ «Вербное» использовались следующие варианты кормов:

 

— комбикорм «Aller Aqua Futura MP EX», датского производства, содержащий иммунномодулятор MacroVita (глюкан + повышенная доза витаминов) (http://aquafeed. ru/korma) (контроль);

 

— комбикорм ООО НПК «Далькорм», г. Владивосток (контроль);

 

—экспериментальный стартовый комбикорм для молоди лососевых: В-1-6 % М—6 % сухого ферментолизата+7 % растительного масла, В-1-6 % Ж—6 % сухого ферментолизата + 7 % рыбного жира, В-2-10 % М — 10 % сухого ферментолизата+7 % растительного масла, В-2-10 % Ж — 10 % сухого ферментолизата + 7 % рыбного жира.

 

Выбор контрольных вариантов кормов основывался на том, что стартовые корма для ЛРЗ Дальневосточного региона в основном закупают от названных изготовителей.

 

Во все варианты кормов (кроме Aller Aqua) перед кормлением молоди кеты вводилось 7 % растительного масла (М) или рыбного жира (Ж), который получен в ТИНРО-центре после рафинации технического рыбного жира, также были добавлены витамины С (1000 мг/кг корма) и Е (400 мг/кг корма). Рыбный жир и растительное масло, использованные для коррекции липидной составляющей кормов, по показателям качества соответствовали нормативным документам (ГОСТ 8714, ГОСТ 31760).

 

Адаптацию молоди к сухим гранулированным кормам проводили в течение 3-5 сут. Суточный рацион рассчитывали по таблицам, в которых представлены рекомендуемые нормы кормления личинок, мальков, сеголеток и других возрастных групп до периода смолтификации тихоокеанских лососей (Канидьев, 1984).

 

Сбор биологических материалов для микроскопических и гистологических исследований осуществлялся один раз в 10 дней.

 

Измеряли отход молоди кеты и морфометрические характеристики, на основании этого вычисляли абсолютный и среднесуточные приросты и другие рыбоводно-био-логические показатели.

 

Абсолютный прирост рассчитывали по разности между начальной и конечной массой рыб.

 

Среднесуточный прирост весовых размеров (С , %) рыб определяли по формуле Винберга (по отношению к начальной массе):

 

/ lg wn - w0 \ Сср = I10 n - lj. 100 %, (i)

 

где Wn — конечная масса, г; Wo — начальная масса, г; n — количество суток в периоде между измерениями (Винберг, 1956; Скляров и др., i984).

 

Полноценность кормления оценивали по величине КК, который показывает количество корма, необходимое для получения единицы прироста рыбы, т.е. отношение съеденного корма к приросту. Величину КК определяли по формуле

 

КК = С/Р, (2)

 

где С — количество съеденного корма, г; Р — величина прироста массы рыбы по отношению к начальной массе, г (Винберг, 1956; Скляров и др., i984). Также оценивался коэффициент упитанности по Фультону (K ), который отражает взаимосвязь между массой и длиной рыб (Щербина, Гамыгин,

 

K = Mi/L3, (3)

 

где L — длина рыб от начала головы до конца чешуйного покрова, см; M1 — масса рыб, г.

 

Для оценки влияния корма на обмен веществ у молоди кеты и их физиологического состояния использовались методы гистологического анализа (Ромейс, i954; Лилли, 1969).

 

В ходе исследований определялся характер складчатости слизистой оболочки пищевода, желудка и кишечника; оценивалось состояние пищеварительных желез и состояние эпителиальной выстилки слизистой оболочки перечисленных выше отделов пищеварительного тракта; определялось наличие язв, новообразований, некрозов, а также изменений в печеночной паренхиме (липоидная дегенерация печени).

 

Состав экспериментальных комбикормов ТИНРО-центра, датского комбикорма «Aller Aqua» и комбикорма от ООО «Далькорм» оценивался по общепринятым методикам (ГОСТ 7б3б).

 

Безопасность кормовых продуктов оценивали согласно Единым ветеринарно-са-нитарным требованиям Таможенного союза* и Техническому регламенту Таможенного союза**.

 

Содержание общего азота определялось по методу Кьельдаля на приборе «Kjeltec 23йй» (Foss, Швеция).

 

Экстракцию липидов и их массовую долю определяли по методу Блайя и Дайера (Bligh, Dyer, i959). Общие липиды конвертировали в метиловые эфиры жирных кислот по известной методике (Carreau, Dubacq, i978) и очищали препаративной тонкослойной хроматографией на стеклянных пластинках с силикагелем (Merck Co. Ltd, Германия, 5 мкм) с использованием системы растворителей бензол : гексан — 7 : 3 (по объему) в качестве элюента. Газожидкостную хроматографию метиловых эфиров проводили на хроматографе GC-16A (Shimadzu, Япония) с использованием капиллярной колонки Supelcowax™ iu (3й,й м х u,32 мм, толщина пленки u,25 мкм, Supelco, США) и пламенно-ионизационного детектора при температуре колонки i9G оС, температуре инжектора

 

* Единые ветеринарно-санитарные требования (Единые ветеринарные требования), предъявляемые к товарам, подлежащим ветеринарному контролю (надзору), с изменениями от 02 марта 2011 г. Утверждены Решением комиссии Таможенного союза от 18 июня 2010 г., N° 317.

 

** Технический регламент Таможенного союза «О безопасности кормов и кормовых добавок» (проект, 2-я редакция) (ТР 201_/00_/ТС). Москва; Минск; Астана, 2012: [Электронный ресурс]. URL: http://docs.cntd.ru/document/1200083875. (Дата обращения: 19.11.2012.)

 

и детектора 240 оС. В качестве газа-носителя использовали гелий со скоростью потока 1 мл/мин и делителем потока 1/60. Идентификацию хроматографических пиков проводили с использованием индексов удерживания ECL (Christie, 1988). Содержание отдельных классов липидов в сравнении со стандартами анализировали методом тонкослойной хроматографии на аналитических пластинах «Sorbfil» с использованием системы растворителей гексан : диэтиловый эфир — 1 : 1 (по объему) с добавлением 0,1 % уксусной кислоты в качестве элюента (Laggai et al., 2013).

 

Определение содержания макро- и микроэлементов и токсичных металлов в образцах осуществляли в соответствии с нормативами (ГОСТ 26927, 26929, 26930, 26932, 26933, 30178, 30538, Р 51301) на атомно-абсорбционном спектрофотометре фирмы «Nippon Jarrell Ach» модель АА-885. В качестве атомизатора использовали однощелочную горелку и пламя ацетилен-воздух.

 

Определение перекисного числа жира осуществляли по методике, основанной на взаимодействии перекисей, содержащихся в жире, с йодидом калия в присутствии уксусной кислоты с выделением йода, с последующим титрованием раствором тиосульфата натрия (Лазаревский, 1955; ГОСТ 7636; ГОСТ Р 53024).

 

Кислотное число жира определяли после нейтрализации свободных кислот, содержащихся в навеске выделенного жира, путем его растворения в спирт-эфирной смеси и последующего титрования раствором едкого натра (Лазаревский, 1955; ГОСТ 7636).

 

Аминокислотный состав белков определяли после кислотного гидролиза 6 N раствором соляной кислоты в течение 24 ч (Остерман, 1985) методом ионно-обменной хроматографии на высокоскоростном анализаторе Hitachi L-8800.

 

Качество протеина определяли путем сравнения количества аминокислот в исследуемом продукте с аминокислотным составом икры кеты. Оптимальным значением аминокислотного баланса является 100 %, менее 100 % означает недостаток аминокислоты в корме, более 100 % — избыток.

 

Результаты исследований обрабатывали статистическими методами (Урбах, 1963, 1975; Кенуй, 1979). Статистическая обработка материала проводилась с использованием пакета программ Excel 2007.

 

Результаты и их обсуждение

 

Технохимический состав используемых кормов

 

Технохимический анализ испытуемых комбикормов показал (табл. 1), что содержание белка во всех кормах находится на одном уровне, за исключением корма «Aller Aqua», где его количество в 1,8 раза выше, а содержание жира в 2,4 раза ниже. Количество углеводной компоненты в корме «Aller Aqua» в 3 раза ниже, чем в экспериментальных кормах. В корме «Далькорм» содержание белка, жира и углеводов занимает промежуточное положение между «Aller Aqua» и экспериментальными вариантами кормов ТИНРО-центра.

 

Согласно полученным в ходе исследований данным, во всех вариантах комбикормов общее количество незаменимых аминокислот (НАК) находится на одном уровне, 42,7-46,2 г/100 г белка (табл. 2). Определение аминокислотного состава кормов показывает, что их состав относительно близок, однако есть и различия, особенно хорошо это проявляется при расчете аминокислотного баланса.

 

При выращивании рыб в искусственных условиях величина баланса незаменимых аминокислот, свидетельствующая об относительно хорошем качестве белка корма, находится в пределах 80-95 %. При этом необходимо, чтобы в корме показатели баланса всех незаменимых аминокислот имели близкие значения (Щербина, Гамыгин, 2006). При низких значениях отдельных определений баланса вступает в силу «закон минимума Либиха». Так, дефицит лишь одной из незаменимых аминокислот приводит к увеличению потребления белка рыбами, что ограничивает эффект от использования не только белка, но и корма в целом пропорционально первой из лимитирующих аминокислот.

 

 

Исходя из обзора литературы, за «идеальный белок» для молоди кеты принят аминокислотный состав икры кеты, так как он имеет достаточно постоянный состав, а содержащийся в икринке белок полностью удовлетворяет жизненную потребность личинки, поскольку в естественных условиях среды появившаяся из икринки личинка является жизнеспособной.

 

Расчет аминокислотного баланса кормов по отношению к икре кеты (табл. 3) показывает, что лучший баланс аминокислот имеет корм В-1-6 %, разработанный в ТИНРО-центре.

 

 

Лимитирующей аминокислотой в кормах, разработанных в ТИНРО-центре, является валин, в корме «Aller Aqua» — гистидин, в корме «Далькорм» — изолейцин.

 

Избыток треонина и метионина-цистеина в «Aller Aqua» (контрольный корм), аргинина и метионина-цистеина в корме «Далькорм» и экспериментальных кормах приводит к дополнительным расходам энергии и пластического материала на переработку излишков белка и выделение токсических продуктов его распада. При этом сокращается синтез мышечной ткани и активируется липогенез, приводящий к развитию липоидной дегенерации печени.

 

Таким образом, на основании данных по аминокислотному составу можно заключить, что аминокислотный состав корма В-1-6 %, разработанного ТИНРО-центром, в большей степени соответствует потребностям молоди кеты.

 

Качественный и количественный состав липидов во всех вариантах комбикормов довольно близок (табл. 4), несмотря на разное качество и состав ингредиентов. Более высокое содержание триацилглицеридов обнаружено в корме «Далькорм» и в экспериментальных вариантах кормов с введением 6 и 10 % сухого ферментолизата и с растительным маслом.

 

В экспериментальных кормах наблюдается незначительное преобладание в содержании суммы фосфолипидов в сравнении с контрольными кормами. Роль фосфолипидов кормов в питании на ранних стадиях развития рыб не полностью ясна. Считается, что они оказывают положительное влияние на рост как личинок рыб, так и ранней молоди, улучшают выживаемость, снижают вероятность неправильного развития личинок и, возможно, улучшают устойчивость к стрессам (Coutteau et al., 1997; Cahu et al., 2003).

 

Согласно литературным данным (Бахарева, 2005; Miller, 2007; Остроумова, 2012; Пономарев и др., 2013), лососи употребляют жир прежде всего как источник энергии. Рыбные жиры вносятся в корма в качестве источника полиненасыщенных жирных кислот, в частности семейства омега-3, таких как эйкозапентаеновая (ЭПК) и докоза-гексаеновая (ДГК) кислоты, которые используются для обеспечения здорового роста.

 

При определении жирнокислотного состава комбикормов установлено (табл. 5), что содержание полиненасыщенных жирных кислот в вариантах кормов с добавлением 6 и 10 % сухого ферментолизата с использованием растительного масла на треть выше, чем в других образцах. Это объясняется тем, что липидная составляющая преимущественно состоит из жиров растительного происхождения. Содержание эйкозапентае-новой и докозагексаеновой кислот в кормах с рыбным жиром в 2,0-3,5 раза выше, чем в кормах с растительным маслом.

 

Определение минерального состава кормов показало (табл. 6), что доминирующим элементом в кормах является кальций, основной структурный элемент костей. Содержание магния и марганца в варианте корма В-1-6 % в 2-3 раза выше, чем в других вариантах кормов.

 

Результаты определения показателей безопасности по содержанию токсичных элементов, радионуклидов, микробиальной обсемененности комбикормов, а также по показателям кислотного и перекисного чисел жира в экспериментальных кормах (без добавления антиокислителей) в хранении при различных температурах не превышают регламентируемых концентраций*.

 

 

Анализ состава экспериментальных кормов показал, что они содержат все необходимые питательные вещества для полноценного развития молоди лососевых и по своему качественному составу не уступают уже представленным на рынке кормам. По качеству разрабатываемые корма соответствуют регламентируемым показателям, что свидетельствует о безопасности их применения в аквакультуре.

 

Рыбоводно-биологические испытания экспериментальных стартовых кормов для молоди лососевых

 

По результатам испытаний комбикормов (табл. 7; рис, 1, 2) наиболее интенсивный рост наблюдался у молоди в варианте с 6 % сухого ферментолизата и растительным маслом. Меньший абсолютный прирост массы тела и коэффициент упитанности по Фультону отмечен у кормов «Aller Aqua» и «Далькорм». В варианте «Далькорм» наблюдался значительный разброс по массе тела, о чем свидетельствует самый высокий коэффициент вариации, составивший 38,99 % при средней массе тела рыбы 0,55 г. Довольно высокая вариативность массы тела молоди также отмечалась и в остальных вариантах кормов (28,2-31,6 %).

 

Соотношение длины и массы тела при кормлении различными вариантами кормов представлено на рис. 1. Согласно полученным данным, коэффициенты аппроксимации в вариантах с опытными комбикормами свидетельствуют о большей эффективности данных кормов в сравнении с контрольными кормами «Aller Aqua» и «Далькорм».

 

* Технический регламент... (2012); Единые ветеринарно-санитарные требования... (2010).

 

При проведении гистологического анализа молоди кеты, выращенной на корме датского производства «Aller Aqua» и «Далькорм», выявлено наличие патоморфоло-гических изменений тяжелой степени у большинства рыб (70 %) (рис. 2).

 

В экспериментальном комбикорме с 10 % сухого ферментолизата липоидная дегенерация печени средней степени была обнаружена у 30 % рыб и носила обратимый характер.

 

В экспериментальном комбикорме с 6 % сухого ферментолизата липоидная дегенерация печени легкой степени была обнаружена у 15 % рыб, носила обратимый характер и не оказала заметного влияния на качество выпускаемой молоди.

 

Эти изменения, возможно, связаны с тем, что корм «Aller Aqua» предназначен для молоди форели. Он разработан с целью быстрого получения товарной продукции за счет легкой усвояемости и добавления ингредиентов — иммунномодуляторов, имеющих гормональное происхождение, стимулирующих темп роста. ООО «Даль-корм» использует рецептуру корма, которая, по-видимому, недостаточно удовлетворяет потребности молоди кеты в питательных веществах (несмотря на хорошее качество производимого корма), что и вызвало развитие патологических процессов в организме рыб.

 

Таким образом, при испытании комбикормов в заводских условиях выявлены преимущества опытных стартовых кормов перед контрольными датского и отечественного производства. Добавление сухого ферментолизата в рецептуру корма в количестве 6 и 10 % заметно улучшает их биологическую ценность и качество молоди.

 

Заключение

 

Разработанные рецептуры стартовых кормов для заводского выращивания молоди лососевых, содержащие 6 и 10 % сухого ферментолизата из минтая, по показателям качества соответствуют регламентируемым показателям, что свидетельствует о безопасности их применения в аквакультуре.

 

Особенностью химического состава экспериментального корма В-1-6 % является более низкое содержание белкового компонента, но более высокое содержание липидов и углеводных соединений в сравнении с контрольными образцами кормов. Аминокислотный состав корма В-1-6 % в большей степени соответствует потребностям молоди кеты.

 

Рыбоводные испытания показали преимущества по кормовым коэффициентам экспериментальных вариантов кормов (КК от 0,64 до 0,86) в сравнении с датским «Aller Aqua» (КК = 1,0) и отечественным «Далькорм» (КК = 1,44).

 

В ходе рыбоводных испытаний кормов производства датской фирмы «Aller Aqua» и ООО «Далькорм» выявлено развитие патоморфологических изменений тяжелой степени в пищеварительной системе молоди кеты, которые значительно снижают качество выпускаемой молоди, препятствуя достижению ею состояния смолтификации.

 

Введение 6 % сухого ферментолизата в рецептуру корма дало положительный результат, развитие легкой степени липоидной дегенерации печени обратимой формы обнаружено только у 15 % исследованной молоди. Липоидная дегенерация печени не оказала существенного влияния на качество выпускаемой молоди.

 

Введение высокобелкового сухого ферментолизата в рецептуры комбикормов для молоди тихоокеанских лососей позволит снизить долю рыбной муки без уменьшения качественной белковой составляющей корма и увеличить жизнестойкость молоди кеты.

 

Коллектив авторов выражает большую благодарность сотрудникам отдела безопасности гидробионтов за помощь при проведении работ по определению показателей качества и безопасности комбикормов, использованных в рыбоводных испытаниях; сотрудникам экспериментального участка кормопроизводства за помощь при изготовлении комбикормов; вед. н. с. В.Г. Марковцеву за помощь при подготовке и проведении рыбоводно-биологических испытаний.

А.Н. Баштовой, А.П. Ярочкин, В.Н. Валова, Г.Н. Тимчишина, К.Г. Павель, Е.В. Якуш, А.М. Павловский*

Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр, 690091, г. Владивосток, пер. Шевченко, 4

* Баштовой Александр Николаевич, кандидат технических наук, заведующий сектором, e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.; Ярочкин Альберт Павлович, доктор технических наук, ведущий научный сотрудник, e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.; Валова Вера Николаевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.; Тимчишина Галина Николаевна, кандидат технических наук, старший научный сотрудник, e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.; Павель Константин Геннадьевич, кандидат химических наук, старший научный сотрудник, e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.; Якуш Евгений Валентинович, кандидат химических наук, доцент, заместитель директора, е-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.; Павловский Алексей Михайлович, научный сотрудник, e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра..